碎次茶中功能性成分茶多酚的提取和纯化+实验 第6页

2.2冰融-水浴法浸取茶多酚[14]
冰融法是生物工程技术中常用于机械破碎植物和微生物细胞的方法，充分的破碎细胞后，更容易浸提茶叶中的有效成分。本实验以水为浸取剂，加入冰融法处理茶叶样品。
2.2.1实验材料与试剂
材料：
陈年茶叶                                                       自 备；
仪器：
仪器名称                       型号                   公司
可见光分光光度计               722s        上海菁化科技仪器有限公司；
数显恒温水浴锅                 HH-4        上海森地科学仪器有限公司；
精密电子天平                   JA2003      上海恒平科学仪器有限公司；
电冰箱                         BCD-245     西门子有限公司；

试剂：
试剂名称           规格型号      单   位               购  自
硫酸亚铁,七水      CP（沪试）     500g       国药集团化学试剂有限公司；
磷酸氢二钠，十二水 CP（沪试）     500g       国药集团化学试剂有限公司；
磷酸二氢钾         CP（沪试）      500g       国药集团化学试剂有限公司；
酒石酸亚铁，四水   CP（沪试）     500g       国药集团化学试剂有限公司；
2.2.2实验方法
1）原理
茶多酚作为酚类物质能与亚铁离子形成蓝色络合物。使用分光光度法测定其含量。
2）试剂和溶液
酒石酸亚铁溶液：1.0g硫酸亚铁和5.0g酒石酸钾钠，水溶解并定容至1L（低温保存10天有效）。
磷酸盐缓冲液：称取23.9g十二水磷酸氢二钠，加水溶解，定容至1L；称取9.08g磷酸二氢钾，加水溶解，定容至1l；去上述两种溶液分别85ml和15ml混合均匀。
3）测定
准确吸取试液1ml，注入25ml容量瓶中，加入4ml水和5ml酒石酸亚铁溶液，混合均匀，再加入磷酸盐缓冲液至刻度，在波长540nm处，以空白溶液作参比，测定吸光度。

4）结果计算
 
式中：L1——试液的总量，ml；
      L2——测定时的用液量，ml；
      M0——试样的质量，g；
      m——试样干物质含量，%；（通过恒重方法确定为0.2375）
      A——试样的吸光度；
1）茶叶预处理
将茶叶去尘净化,晾干,粉碎过60目筛，称取一定量的茶粉，加入一定的蒸馏水，放入冰箱冷冻直至溶液完全冻结。然后取出，在40℃水浴融化，反复冰融3次后，冷藏备用。水吸收丙酮填料塔的设计+工艺流程+结构设计+CAD图纸
2）实验方法
称取定量的茶粉，加入定量的蒸馏水，置于恒温水浴锅中浸提一段时间，过滤，得茶多酚浸提溶液。

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