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铅中毒对小鼠神经行为的影响(2)

时间:2021-04-15 21:18来源:毕业论文
2.2 主要试剂和仪器 乙酸铅,去离子水,鼠笼(2只),饮水瓶,自动记录水迷宫,Morris水迷宫,温度计,玻璃棒, 电子 称。 2.3 实验方法 2.3.1 铅中毒模型

2.2 主要试剂和仪器

乙酸铅,去离子水,鼠笼(2只),饮水瓶,自动记录水迷宫,Morris水迷宫,温度计,玻璃棒,电子称。

2.3 实验方法

2.3.1 铅中毒模型的制备

小鼠20只, 随机分成2组( 每组10只) , 一组为正常对照组, 以去离子水自由饮服; 另一组为铅染毒组,以2.5g/L乙酸铅水溶液自由饮服, 染毒时间为5周。

2.3.2 Morris水迷宫行为测定

Morris水迷宫是心理学家Morris于20世纪80年(1981)代初设计并且应用于脑学习记忆机制研究的一种实验手段,其在AD研究中的应用非常普遍。较为经典的Morris水迷宫,测试程序主要包括定位航行试验和空间探索试验两个部分。其中定位航行试验(place navigation)历时数天,每天将大鼠面向池壁分别从4个入水点放入水中若干次,记录其寻找到隐藏在水面下平台的时间(逃避潜伏期,escape latency)。空间探索试验(spatial probe)是在定位航行试验后去除平台,然后任选一个入水点将小鼠放入水池中,记录其在一定时间内的游泳轨迹,考察大鼠对原平台的记忆。

饲养五周后将小鼠用于实验,测量小鼠学习记忆能力。实验时将池壁上标有东西南北四个入水点,其将水池等分为四个象限,为E、W、S、及N象限。在W象限放置一个圆形透明平台,平台顶低于水面1-2cm。训练期间平台和水盆以外的参照物应该保持不变。测量小鼠对水迷宫学习和空间记忆能力。实验共进行5d。每天训练一次,训练时随机选择一个入水点(4次选择入水点不应重复),将小鼠面向池壁放入水中,观察并记录10个小鼠寻找并爬上平台所需各自时间(潜伏期)。4天训练分别从不同的入水点入水,如果小鼠在3Min 内未找到平台,将其引至平台稳定l0s。之后再次测定。第五天移去平台并记录小鼠单位时间内经过平台的次数和运动轨迹。

2.3.3 自动记录水迷宫文献综述

将两组小鼠共20只分别放入自动记录水迷宫中进行测试其逃出时间,每天测试3次在水温25℃下,共进行3天。记录数据进行分析。

2.4 统计学数据分析

用SPSS软件对数据进行统计学分析。组间比较采用完全随机设计方差分析处理。相关性分析采用Pearson相关分析,以P≤O.05表示差异有统计学意义。

表1:自动记录水迷宫实验组小鼠所用时间(s)

小鼠次序 时长1 时长2 时长3

1 49 59 29

2 9 25 16

3 5 7 18

4 33 24 29

5 19 27 38

6 22 20 21

7 10 15 7

8 45 42 18

9 29 28 18

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