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以自组装HA/RHB/DNA三元复合物为非病毒基因载体的制备表征与细胞学评价(4)

时间:2018-03-26 14:22来源:毕业论文
这类聚合物通常比缺乏二硫键的类似物具有更高的DNA转染效率[25]。这可归因于二硫化物基因的生物降解性和在细胞内环境所连接的聚合物。同时也发现,


这类聚合物通常比缺乏二硫键的类似物具有更高的DNA转染效率[25]。这可归因于二硫化物基因的生物降解性和在细胞内环境所连接的聚合物。同时也发现,尽管存在阳离子的本性,但SS-PAAS仍然毒性较低或无毒。已经观察到,通过增加PAAS的支化度会使转染效率增加,细胞毒性降低。在这种情况下,使用PAA最高程度的分支可以得到与PEI相仿的转染效率。因此我们推测,在主链的连接中含有硫化物的超支化PAAS在DNA转染上相比于传统的线性PAAS具有优势。首先,在聚合物中仲胺和叔胺的密度增大了CA在很宽的pH值范围内缓冲,这可能导致通过质子海绵聚合物/DNA复合物的内体逃逸效果的增强,并增强相互作用膜的破坏性[25]。其次,由于其易于合成,超支化的PAAS可以用作平台系统从而系统的研究末端集团的效果。在超支化聚合物的终端功能和单体单元的总数的数量之间的比例比直链聚合物提高显著。因而,通过选择合适的末端基团的支化聚丙烯酸聚合物能够提高在水中的溶解度,调节聚合物与DNA之间在多聚物以及与他们的生物环境中的转染过程中多聚物的相互作用。以及与他们的生物环境中的转染过程中多聚物的相互作用。
RHB结构中的大量胺基,进入溶酶体后产生“质子海绵效应”,保护 DNA不被溶酶体破坏(质子海绵效应见图)。由于RHB结构中存在二硫键,在体内生理条件下被细胞内还原型谷胱甘肽还原降解,使RHB高聚物降解成小分子化合物,不仅可以提高基因药物的细胞内转染效率,而且大大降低了材料的细胞毒性。尽管如此,目前RHB仅用于体外转染,还未见体内转染的报道。这是因为RHB/核酸复合物表面带大量正电荷,对肿瘤靶向性差、血清稳定性低,体内循环时间短,基因难以长期稳定表达。因此,增强RHB/核酸复合物的肿瘤靶向性、降低表面正电荷性是非病毒基因递送载体体内应用基因药物治疗肿瘤的关键问题。
 
2.1 子海绵作用示意图
2.2 靶向受体结合的基因药物载体
一般的非病毒性基因载体材料不具备靶向特异性,因此,为使得载体材料能在肿瘤细胞或特异组织中定向迁移并携带DNA进行细胞转染,就需要在载体表面进行靶向基因的修饰,使其具有靶向特异性。以下将围绕多肽、天然高分子HA等靶向配体耦合于非病毒性基因载体上的研究。
2.2.1  以多肽作为药物传递系统的靶头
近期研究发现[11-12],一类IF7肽易与Anne 1蛋白(ANXA1)的15 Ada片段能特异性结合。ANXA1,在肿瘤血管内皮细胞表面特异性高表达,是众多肿瘤血管高度特异性的标记物[12]。通过蛋白组学分析表明,ANXA1是钙调节磷脂结合和膜结合蛋白(Annex ins)家族中的成员(结构见图)。在这项研究中,筛选了系列IF7相关肽的序列用于肿瘤靶向性递送系统中。前期研究已经合成了一个特定的ANXA1结合IF7相关肽(命名为IC-8),可以作为一种体内高效率抗肿瘤药物传送系统的靶向头基。 以自组装HA/RHB/DNA三元复合物为非病毒基因载体的制备表征与细胞学评价(4):http://www.youerw.com/yixue/lunwen_11795.html
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