3。2 SSR标记引物 12

3。3 SSR标记的PCR产物电泳情况 15

3。4 SSR标记技术未来展望 17

参考文献： 18

附表： 20

致谢 21

1 引言

天豇豆（Cassia sophera L。）是豆科苏木亚科决明属植物，也称槐叶决明和茳茫决明。分布在中国中部、东南部、南部及西南部各省区，北部部分省区有栽培。多生长于山坡和路旁。原产地位于亚洲热带地区，现广布于世界热带、亚热带地区。来自优W尔Y论W文C网WWw.YoueRw.com 加QQ7520,18766

天豇豆性味：苦，寒。具有除痰止渴，令人不睡，调理身体的作用。天豇豆多生长于山坡和路旁。原产亚洲热带地区，现广布于世界热带、亚热带地区，小叶较小，有5-10对，长1。7-4。2厘米，宽0。7-2厘米，椭圆状披针形，顶端急尖或短渐尖。花期7-9月；果期10-12月。嫩叶和嫩荚供食用；种子为解热药。据《中药大辞典》中记载：“茳茫决明，性平，无毒，味甘滑”。具有除痰止渴，令人不睡，调中的功效；特别重要的是槐叶决明叶的醇提物有松弛支气管平滑肌的作用。但其中究竟是什么成分在起作用，如何起作用还不明朗，有待于通过现代高通量和高精度的手段进行解析。

天豇豆作为有效地中药成分，中药在提取方面，目前的现有技术还不够成熟，所以在槐叶决明中一方面开展叶的醇提物中成分组成分析、药理实验和结构相关研究；另一方面开展槐叶决明不同植株部位主要有效成分的含量差异比较评价，不但有助于我们了解和解析槐叶决明的主要成分组成及其药用功效，更能够解决在实际生产需要，提高天豇豆的生产量。

但是遗传多样性的丧失制约了天豇豆的育种，所以我们需要利用现有的科学技术进行探索新发现。将目前有的亲本材料进行遗传多样性研究，可以大大地减少类似遗传背景的组合，也有效的减少了天降都、豇豆育种的工作量和工作时间，对于亲本的杂交实验具有非常重要的意义。另外，对于天豇豆的遗传多样性提供了可能。论文网

在基因组中存在着大量的重复序列，其中的简单重复序列在真核生物基因组中广泛存在，一般是以1-6bp组成较低程度的重复序列，主要以2-3个核苷酸为重复单位，从进化角度看物种间重复序列的差异是自然选择的结果。所以鉴定SSR在基因组分析中有重要意义。随着时代的进步和生物技术的发展，出现了一种名字叫做微卫星开发的的技术。微卫星标记是DNA标记技术的一种。微卫星位点通常通过聚合酶链式反应，扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳分析测序并根据大小分离等位基因进行检测。EST中含有SSR序列，它主要是由一类由几个核苷酸（1-5个）为重复单位组成的长达几十个核苷酸的DNA序列，具有许多优点，较其他分子标记能更好揭示天豇豆种质资源遗传多样性。

因此本研究选择的天豇豆物种是来自13个地区，对天豇豆的遗传多样性进行剖析，以品种品质和品种选择上的育种应用提供重要的理论指导思想，为研究天豇豆的遗传多样性提供一定的参考。

2 材料和方法

2。1 试验材料 

图1。 槐叶决明各生长时期

①：种子萌发；②：萌芽；③：幼苗；④：小苗；⑤：开花；⑥：结荚期；

⑦：鼓粒期；⑧：幼嫩种子文献综述

槐叶决明（天豇豆）种质资源浙江省药用植物种质改良和质量控制技术重点实验室从省内新昌、义乌等地。对收集到的槐叶决明种质资源分别在临安和下沙进行同质园栽培，现已完成2015年的栽培，收获了大批根、茎、叶和种子图1。为2015年槐叶决明（天豇豆）规范化栽培过程中的各生长时期照片。 天豇豆微卫星标记开发(2):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_196413.html