2.4 EPS提取和三维荧光光谱

采用热提取的方法提取胞外聚合物（EPS）[14]：将总体积25 mL的污泥样本在3000 rpm下离心30 min使固液分离。上层清液为可溶性EPS（S-EPS）。剩下的颗粒污泥经清洗后用0.85%的NaCl溶液重悬至25 mL。然后将混合液进行100℃热处理1 h，在3000 rpm下离心30 min。得到的上清液为固着性EPS（B-EPS）。混合液经0.45 μm生物膜过滤后最终得到EPS。估算出可溶性EPS和固着性EPS中糖类和蛋白质含量。利用蒽酮法测定可溶性糖， Lowry法测定蛋白质[15]。三维荧光光谱使用荧光分光光度计测定（日立F-4600荧光分光光度计）。三维荧光光谱中的发射波长和激发波长为200-600 nm，增量为5 nm。激发和发射缝隙维持在10 nm，扫描速率为12000 nm/min。为了检测低能级的光源，光电倍增管工作电压设置为500 V。以双蒸馏水光谱为空白对照，采用Origin 8.0软件处理EEM数据。在每个EEM光谱中用等高线表示荧光强度。