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竹叶黄酮的提取及抗氧化活性研究 第7页

更新时间:2016-11-1:  来源:毕业论文
取8支大试管,分别加入0.5g竹叶粉,然后加入相同浓度不同体积的乙醇,置于70℃的水浴中,恒温水浴1小时后取出上层液体离心过滤。滤液分别取出1mL,按照测标准曲线的方法添加试剂测定其吸光度。
(3)提取温度对提取效果的影响
温度分别为30℃、40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃,共7个水平进行实验。
取7支大试管,分别加入0.5g竹叶粉,然后加入相同体积相同浓度的乙醇,分别置于7个不同温度的水浴锅中,恒温水浴1小时后取出上层液体离心过滤。滤液分别取出1mL,按照测标准曲线的方法添加试剂测定其吸光度。
(4)提取时间对提取效果的影响
时间分别为30min、60min、90min、120min,共4个水平进行实验。
取4支大试管,分别加入0.5g竹叶粉,然后加入相同体积相同浓度的乙醇,置于70℃的水浴中,恒温水浴,每30min取出一管,取出上层液体离心过滤。滤液分别取出1mL,按照测标准曲线的方法添加试剂测定其吸光度。                     
2.3.3 清除超氧阴离子自由基能力测定
取4.5mL50mmol/L 的Tris-HCl缓冲溶液(pH8.2)加入试管中,再加入蒸馏水4.0mL,混匀后在25℃水浴中保温20min,取出后立即加入在25℃水浴中预热过的50 mmol/L的邻苯三酚0.5mL(以10mmol/L的HCl代替邻苯三酚作为空白),混匀后立即倒入比色皿中,于420nm处每隔30s测A值一次,共测5min,计算对照溶液吸光度随时间的变化率Fr。
然后再取4.5mL50mmol/L 的Tris-HCl缓冲溶液(pH8.2)加入试管中,加入1.0mL的待测样品,再加入3.0mL的蒸馏水,混匀后在在25℃水浴中保温20min,取出后立即加入在25℃水浴中预热过的50mmol/L的邻苯三酚0.5mL,混匀后立即倒入比色皿中,于420nm处每隔30s测A值一次,共测5min,计算待测样品吸光度随时间的变化率Fx。
将Fx和Fr代入公式计算待测样品溶液对•O2的清除率。清除率按下式计算:        自由基清除率(%)= 。                               (2.3.3)       
2.3.4清除1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH•)能力测定
在一具塞试管中依次加入3.0mL1.0×10-4mol/L DPPH•乙醇溶液和1.0mL待测样品,总体积为4.0mL,混匀30min后,于1cm比色皿中测定A517,测定值记为Ai;加入3.0mL 1.0×10-4mol/L的DPPH•乙醇溶液和1.0mL蒸馏水混匀后,测定值记为A0;加入3.0mL体积分数为50%的乙醇和1.0mL待测样品溶液混匀后,测定值记为Aj。根据公式计算清除率,抗氧化性能用清除率来表示,清除率越大,抗氧化性能越强。自由基清除率公式为:
自由基清除率本文来自优$文)论'文`网,毕业论文 www.youerw.com 加7位QQ324~9114找原文(%)=                             (2.3.4)
3.实验结果与分析
3.1标准曲线实验结果与分析
表3.1 标准曲线实验结果
编号 芦丁浓度(mg/mL) 5% NaNO2 10%Al(NO3)3 4%NaOH A510
1 0.01 1.5 1.5 20 0.070
2 0.02 1.5 1,5 20 0.158
3 0.03 1.5 1.5 20 0.223
4 0.04 1.5 1.5 20 0.303
5 0.05 1.5 1.5 20 0.450
6 0.06 1.5 1.5 20 0.587
7 0.07 1.5 1.5 20 0.677
8 0.08 1.5 1.5 20 0.722

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