目前国广泛应用于食品中亚硝酸盐含量测定的方法主要有发光分析法、催化荧光光度法、气相色谱法、生物传感器法、离子色谱法、离子选择电极法和示波极谱法等。本实验用盐酸萘乙二胺法测定发酵食品中亚硝酸盐的含量，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，与盐酸萘乙二胺偶合成紫红色偶氮染料，在550nm处有最大吸收峰，用于检测发酵食品中亚硝酸盐的含量[5-8]，有令人满意的结果。

1 实验

1。1实验方法原理

1。1。1方法：分光光度法 

在稀盐酸介质中，NO2-与碱性品红发生重氮反应，用8—羟基喹啉作偶联剂，在弱碱性条件下，生成茶红色偶氮染料来定量测定NO2-含量。最常用的方法是盐酸萘乙二胺法,也就是用分光光度计测定样品吸光度,分光光度法以其设备简单、操作快捷、灵敏度高、结果直观的优点,深受欢迎。本实验研究了以α-萘胺为显色剂,利用紫外可见分光光度计测定肉制品中的亚硝酸盐的含量的方法。结果证明,此方法简单、快捷、准确,是一种食品检测的方法。文献综述

1。1。2。原理

样品经过沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸性溶液中亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮反应，生成的重氮化合物，重氮化合物再与盐酸萘乙二胺偶联成紫红色的偶氮染料，在最大吸收波长为550nm 处，测定吸光度并与标准比较定量。由于摄入过量的亚硝酸钠盐对人体有一定的危害，因此国家食品安全标准规定酱腌类酵食品中亚硝酸盐限量为20mg/kg

1。2试剂

实验用水为蒸馏水，试剂不加说明者，均为分析纯试剂。

1。2。1氯化铵缓冲液:1L容量瓶中加入500mL水，准确加入20。0mL盐酸，振荡混匀，准确加入50mL氢氧化铵，用水稀释至刻度。必要时用稀盐酸和稀氢氧化铵调试至pH9。6～9。7。

1。2。2硫酸锌溶液(0。42mol/L):称取120g硫酸锌(ZnSO4。7H2O)，用水溶解，并稀释至1L。

1。2。3氢氧化钠溶液(20g/L):称取20g氢氧化钠用水溶解，稀释至1L。

1。2。4对氨基苯磺酸溶液:称取10g对氨基苯磺酸，溶于700mL水和300mL冰乙酸中，置棕色瓶中混匀，室温保存。

1。2。5N-1-萘基乙二胺溶液(1g/L):称取0。1gN-1-萘基乙二胺，加60%乙酸溶解并稀释至100mL，混匀后，置棕色瓶中，在冰箱中保存，一周内稳定。

1。2。6显色剂:临用前将N-1-萘基乙二胺溶液(1g/L)和对氨基苯磺酸溶液等体积混合。

1。2。7亚硝酸钠标准溶液:准确称取250。0mg于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解入500mL容量瓶中，加100mL氯化铵缓冲液加水稀释至刻度，混匀，在4℃避光保存。此溶液每毫升相当于500ug亚硝酸钠。来-自~优+尔=论.文,网www.youerw.com +QQ752018766-

1。2。8亚硝酸钠标准使用液:临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液1。00mL，置于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5。0ug亚硝酸钠。

1。3 仪器

721 型分光光度计，水浴锅，组织捣碎机，PH计，电子天平，烘箱，大玻璃瓶（3个），容量瓶（100mL、1000mL各1个），量筒（50、500mL各1个），具塞比色管（50mL30个带刻度），烧杯（100mL，3个），三角瓶（100mL，3个），移液管(5mL一支，1mL2支),研钵（5个），漏斗及漏斗架（3个）,定性滤纸, 棕色试剂瓶,洗耳球,刻度吸管,玻璃棒