4褐蘑菇抗氧化作用及其评价方法

4。1自由基清除能力

自由基是人体中的代谢产物，正常机体自由基的产生和消失会保持平衡，但如果自由基过多就会对机体造成一定的氧化损伤，进而导致细胞衰老、机体产生病变等等，因此抗氧化活性是天然物质开发所不可缺少的重要评价条件之一[9] 。本实验选择从DPPH自由基和羟基自由基清除率两个方面来考察食用菌褐蘑菇壳聚糖抗氧化能力的强弱。来-自~优+尔=论.文,网www.youerw.com +QQ752018766-

4。1。1 DPPH自由基的清除方法

本实验采用DPPH分析法。用移液枪准确吸取2mL不同浓度的壳聚糖稀释液加入10ml离心管，依次加入浓度为1×10 -4 mol/L DPPH无水乙醇溶液2mL，充分混匀后避光反应30min，于517nm波长处测定其吸光度Ai ；以等体积10%乙酸代替壳聚糖溶液测定空白对照组在517nm处的吸光度；样品对照组则以等体积10%乙酸代替DPPH溶液，以消除样品本身颜色的颜色。并以等体积10%乙酸空白调零[10]。同时以BHT作为阳性对照，以双孢蘑菇壳聚糖为阴性对照。平行实验三次。按照下式计算壳聚糖对DPPH自由基的清除率：

清除率(％)=[(A0－Ai＋Ax)/ A0]×100

式中：A i为壳聚糖样品溶液在517nm处吸光度值；A0为不加壳聚糖样品后测得的吸光度；Ax为不加DPPH溶液后测得的吸光度值。