拟南芥XTH24超表达转基因株系的构建

摘要木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶(XTH)是催化木葡聚糖分子转移或水解的一类酶,它能内切木葡聚糖聚合体,将产生的还原性末端连接到另一个木葡聚糖链或水分子上,在细胞壁重构和影响植物生长发育方面有重要作用。71967

我们采用PCR技术扩增拟南芥XTH24基因，得到XTH24片段并将其转入pCAMBIA1300-35S超表达载体中，构建了pCAMBIA1300-35S-XTH24超表达载体，利用农杆菌介导的转化法转基因得到阳性株系，抽提阳性株系的基因组后做PCR验证后送测序，鉴定转基因株系得到纯合转基因株系。

Abstract The xyloglucanase transglycosidase / hydrolase (XTH) are a class of catalytic molecules xyloglucanase enzyme hydrolysis or metastasis, which can be endo-xyloglucan polymers, the reducing end of a connection to another glucan chains on wood or water molecules in the cell wall remodeling, aspects of plant growth and development has an important role。

We amplified fragment ofArabidopsis XTH24 by PCR and cloned it into pCAMBIA1300-35S, to construct pCAMBIA1300-35S-XTH24 overexpression vector。 Then we tried to gettransgenic lines by Agrobacterium-mediated transformation。

毕业论文关键词：拟南芥； XTH24；超表达载体； FT蛋白

Key words: Arabidopsis thaliana; XTH24; super expression vector; FT protein

引言 4

1 材料与方法 7

1。1 目的基因的扩增 7

1。1。1 材料 7

1。1。2 方法 7

1。2 切胶回收 7

1。2。1 材料 7

1。2。2 方法 7

1。3 双酶切 8

1。3。1 材料 8

1。3。2 方法 8

1。 4 酶切验证 8

1。4。1 材料 8

1。4。2 方法 8

1。 5 切胶回收目的基因和载体 9

1。5。1 材料 9

1。5。2 方法 9

1。 6 连接 9

1。6。1 材料 9

1。6。2 方法 9

1。 7 转化 10

1。7。1 材料 10

1。7。2 方法 10

1。8 挑单克隆 10

1。8。1 材料 10

1。8。2 方法 10

1。9 抽提质粒及鉴定 11

1。9。1 材料 11

1。9。2 方法 11

1。10 酶切验证 11

1。10。1 材料 11

1。10。2 方法 11

1。11 送测序 12

2 结果与分析 12

2。1 目的基因的扩增 12

2。2 双酶切验证 12

2。3 挑单克隆 13

2。4 挑单克隆后提质粒PCR 拟南芥XTH24超表达转基因株系的构建:http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_81765.html