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木霉漆酶基因的原核表达研究(3)

时间:2019-09-03 12:46来源:毕业论文
(5) 考马斯亮蓝R-250染色液 考马斯亮蓝R-250 0.5g 异丙醇 125mL 冰醋酸 50mL 用蒸馏水溶解,定容至500mL(会有些许颗粒残留,可用滤纸除去颗粒物质),室温


(5)  考马斯亮蓝R-250染色液
        考马斯亮蓝R-250          0.5g
        异丙醇                    125mL
        冰醋酸                    50mL
    用蒸馏水溶解,定容至500mL(会有些许颗粒残留,可用滤纸除去颗粒物质),室温保存。
(6) SDS-PAGE凝胶脱色液 
        无水乙醇                  25mL
        冰醋酸                    50mL
用蒸馏水溶解,定容至500mL,室温保存。
1.3.3 菌种的活化
按分子克隆的操作活化菌种如下:
① 将菌种(转入了大肠杆菌DH5α的重组质粒PET52b-Laccase)冻藏管置于冰上解冻,但不要待其融化完(避免反复冻融菌种而致使菌种死亡),无菌操作下(超净工作台)用接种环将少许菌液划线于加有抗生素Amp(50ug/mL)的LB平板复壮,并将冻藏管马上放回-80℃冰箱。
② 将平板置于37℃恒温培养箱培养过夜,第二天挑取单菌落即可。
③ 挑选茁壮的菌落,接种到液体培养基LB(含Amp,50ug/mL)中培养37℃,180rpm过夜培养,并进行二次活化,得到生长良好活性高的菌落。 木霉漆酶基因的原核表达研究(3):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_38750.html
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