丹参中脂溶性成分的提取方法的探究
【摘要】目的 丹参中脂溶性成分丹参酮ⅡA是丹参制剂中重要的活性成分,也是成品的主要检测指标,通过对丹参酮ⅡA提取方法的研究,对丹参制剂提取工艺的优化具有重要的现实意义。方法 根据当前丹参制剂的生产工艺出发,在提取时间、溶媒倍数、提取温度、溶媒浓度等方面进行筛选试验,利用高效液相色谱法进行含量测定。结果 丹参的最佳提取重要条件为,4倍量90%的乙醇,70℃温浸1.5小时,通过实验证明采用以上所述的丹参提取方法,干燥过程同样采用低温减压浓缩的丹参提取物中丹参酮ⅡA转移率超过50%。结论 本方法简便,快速,利于有效成分保留,适用于丹参中脂溶性成分的提取,对于丹参制剂的生产工艺优化有指导意义。
【关键词】丹参酮ⅡA 提取方法 工艺优化
丹参为唇形科鼠尾草,属多年生草本植物丹参的干燥根,其活性成分可分为脂溶性成分和水溶性酚酸成分,前者主要包括丹参酮ⅡA、丹参酮I和隐丹参酮等;后者主要包括丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、丹酚酸B和丹酚酸C等[1]。本文以脂溶性成分丹参酮ⅡA为指标对提取方法进行研究。丹参酮ⅡA在临床上具有很好的药理活性,有抗凝血、促纤溶作用[2]。我们以丹参酮ⅡA这一活性成分为指标,从提取时间、提取溶媒倍数、提取温度、提取溶媒浓度等方面进行试验,以筛选提取条件,为提取工艺优化奠定基础。
1 药品与试剂
丹参(蓟县野生药材),丹参酮ⅡA对照品(购于中国药品生物制品检定所),甲醇(分析纯)、乙醇(药用级)、蒸馏水。
2 方法
2.1色谱条件的确定 高效液相色谱仪:SP-8100。色谱柱:YMC C18分析柱(4.6mm×150mm)。流动相:甲醇-水(75∶25)。检测波长:270nm。流速:1ml/min。
2.2对照品溶液的制备 精密称取丹参酮ⅡA对照品,用分析甲醇配制成浓度为0.0502mg/ml的对照品溶液。
3 试验及结果
3.1试验用丹参药材中丹参酮ⅡA的含量测定 取丹参粉末(过三号筛)0.3g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加甲醇50ml,密塞,称定重量,加热回流1小时,放冷,密塞,再称定重量,用甲醇补足重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。测得的丹参药材中丹参酮ⅡA含量为0.53%。
3.2提取时间对丹参酮ⅡA含量的影响 取四份丹参药材,每份50g,各加乙醇溶液200ml,在水浴中回流(微沸)不同的时间,滤过,滤液置200ml容量瓶中,放至室温,用乙醇溶液加至刻度,混匀,取少量上述溶液离心,取上清液作为供试品溶液。按上述检测方法进行含量测定,通过实验可以看到提取丹参的时间在0.5小时至1.5小时,所得到的提取液中丹参酮ⅡA的含量没有显着变化,当提取时间延长至2.0小时时,提取液中丹参酮的含量反而下降,所以提取时间应不超过1.5小时。 3.3溶媒倍数对丹参酮ⅡA含量的影响 取四份丹参药材,每份50g,分别加入不同量的乙醇溶液,水浴回流1.5小时(微沸),滤过,滤液置不同量的容量瓶中,放至室温,用乙醇溶液定容,混匀,取少量上述溶液离心,取上清液作为供试品溶液,按上检测方法进行含量测定,提取所用溶媒倍数超过4倍时,提取液中丹参酮ⅡA的含量并没有明显的提高,从经济上考虑,选择4倍量是比较合理的。
http://www.youerw.com 3.4提取时温度对丹参酮ⅡA含量的影响 取优份丹参药材,每份50g,各加乙醇溶液200ml,分别在不同温度的水浴中提取1.5小时,滤过,滤液置200ml容量瓶中放至室温,用乙醇溶液定容,混匀,取少量上述溶液离心,取上清液作为供试品溶液,按上述检测方法进行含量测定,提取温度试验表明,提取温度在低于70℃时,提取液中丹参酮的含量随温度的升高而增加,超过70℃时,提取液中丹参酮ⅡA的含量随温度的升高反而下降。
3.5醇浓度对丹参酮ⅡA含量的影响 取四份丹参药材,每份50g,加入不同浓度的乙醇溶液各200ml,在70度水浴中温浸1.5小时,滤过,滤液置200ml容量瓶中放至室温,用相应浓度的乙醇溶液定容,混匀,取少量上述溶液离心,取上清液作为供试品溶液,按上述检测方法进行含量测定,提取时溶媒浓度越高,提取液中丹参酮含量也越高,但90%的醇提液与95%的醇提液中丹参酮ⅡA含量没有大的变化,所以提取时可以采用90%的醇代替95%的醇。
4 讨论
4.1由以上结论可见,丹参的最佳提取条件为:4倍量90%的乙醇,70℃温浸1.5小时。通过实验证明采用以上所述的丹参提取方法,干燥过程同样采用低温减压干燥得到的丹参提取物中丹参酮ⅡA有50%以上能被保留下来。
4.2关于丹参药材我们也做了多品种考察,在此不做详述,但比较中我们认为,天津蓟县和周边地区所产野丹参中含量最佳,故以其为研究对象。
丹参中脂溶性成分的提取方法的探究下载如图片无法显示或论文不完整，请联系qq752018766
