转基因青蒿毛状根生物转化青蒿素的研究(2)

Keyword: Artemisinin; DBR2; ALDH; GC; Artemisia annua L; hairy root

1。引言 5

1。1青蒿及青蒿素的简介 5

1。2青蒿素及其衍生物的药用价值 5

1。3青蒿素生物合成途径上的关键酶基因ALDH及DBR2 6

1。4毛状根及转基因技术 6

1。5本研究目的及其意义 7

1。6本研究的技术路线 7

2。实验部分 7

2。1 实验材料及试剂 7

2。1。1 植物材料 7

2。1。2 菌株和质粒 7

2。1。3 仪器设备 8

2。1。4试剂及试剂盒 8

2。2 实验操作方法及步骤 10

2。2。1 青蒿无菌苗的继代培养 10

2。2。2重组菌株的构建 10

2。2。3 C58C1感受态细胞的制备 11

2。2。4 重组质粒转C58C1感受态细胞 11

2。2。5 PCR验证阳性克隆 11

2。2。6 C58C1工程菌株的活化 12

2。2。7 青蒿毛状根的诱导 13

2。2。8 青蒿毛状根的PCR鉴定 13

2。2。9 转基因青蒿毛状根的源Q于W优E尔A论S文R网wwW.yOueRw.com 原文+QQ75201,8766 振荡培养 14

2。2。10 青蒿素的萃取 15

2。2。11 青蒿素及衍生物的含量测定 15

3 结果与讨论 16

3。1 青蒿苗的继代培养 16

3。2 工程菌的PCR验证 16

3。3 毛状根的诱导以及PCR验证 17

3。4 青蒿素以及其中间产物标准曲线的制备 18

3。5 毛状根中青蒿素的提取与含量测定 21

4总结与展望 21

参考文献: 21

致谢 23

1。引言

1。1青蒿及青蒿素的简介

青蒿（Artemisia carvifolia）的生长周期为一年，茎干直挺，在顶端分支较多，拥有纵向脊。叶片对生，青蒿中部叶子呈羽毛状裂开，分为数个小裂片。青蒿里有挥发油，也有艾蒿碱( Abrotanine, C21H22N2O）和苦味素等。可用于中药熬制，但并不是严格意义上的青蒿。来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766

严格意义上的中药青蒿，为菊科植物黄花蒿Artemisia annua L。的脱水地上部分。在开花期临近时采摘，截取地上部分，捣碎，晒干。具有去热解毒，除湿气，治疗疟疾的功用。对于各种寒热湿热黄疸均具有良好疗效，且价格便宜，是人民治病的不二之选。青蒿的枝干呈圆柱状，在顶层分生，一般大概在35-85cm之间，直径0。2至0。6厘米；青蒿外观为棕绿色；触感较坚实，质脆。具有独特的香味，有浅浅苦味，闻之清爽醒脑。其中颜色深绿，分支多，味道浓郁的为佳品。转基因青蒿毛状根生物转化青蒿素的研究(2):http://www.youerw.com/yixue/lunwen_195516.html