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金线莲(无金黄色网状叶脉和金黄色网状叶脉)分子标记分析(3)

时间:2020-04-05 18:18来源:毕业论文
金线莲为兰科草本植物,愈伤组织诱导难度较大,选取合适的外植体材料尤为重要。金线莲组培时大多使用茎段和茎尖作为外植体,也有选择试管苗的叶、

金线莲为兰科草本植物,愈伤组织诱导难度较大,选取合适的外植体材料尤为重要。金线莲组培时大多使用茎段和茎尖作为外植体,也有选择试管苗的叶、茎段、茎片或类原球茎。其中,不定芽是金线莲愈伤组织外植体的最佳选择,以不定芽为诱导材料较容易生成愈伤组织[15]。自然状态下,金线莲生长除了众多伴生真菌和细菌之外,同时还有大量内生菌,给组培工作带来众多障碍,化学消毒过程对其外植体存在较大的损伤。试验中采用75%乙醇浸泡30s,1%氯化汞浸泡8min,以获得良好的消毒效果。为了能够获得较高的增殖倍数,粗壮的芽苗,同时诱导芽苗生根,使用以MS作基本培养基添加6-BA/2mg.L-1+NAA/0.5mg.L-1激素作处理,以获得良好效果。不添加琼脂的液体培养基优于半液态和固态的培养基。培养基中可适当添加不同有机物如香蕉、蛋白胨。培养基中添加香蕉能够促进金线莲芽苗的增殖和壮苗的培养,培养基中添加蛋白胨可以得到特别粗壮的单株带根无菌苗。

1.3分子标记

    分子标记技术是对植物进行遗传多样性分析、鉴定种质资源的重要方法。顾慧芬等通过RAPD分子标记对组培金线莲和野生金线莲基因组DNA多态性扩增条带的分析,鉴定出金线莲组培苗的来源[5],张福生等通过对金线莲 ISSR 反应体系的建立与优化,对野生金线莲的遗传多态性及组培金线莲的遗传变异进行了研究[16]。

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