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小麦赤霉病菌β2-微管蛋白E198A突变型对多菌灵的抗药性调控研究(3)

时间:2018-11-20 20:15来源:毕业论文
(2)加入到2ml的灭菌离心管中,并加入800l 2% CTAB,摇匀,65℃恒温水浴1 h,期间混匀2-3次; (3)加入等体积的苯酚-氯仿-异戊醇(体积比为25:24:1),颠倒


(2)加入到2ml的灭菌离心管中,并加入800μl 2% CTAB,摇匀,65℃恒温水浴1 h,期间混匀2-3次;
(3)加入等体积的苯酚-氯仿-异戊醇(体积比为25:24:1),颠倒混匀后,12000 rmin-1离心10 min;
(4)取上清液于新离心管中,加入等体积的氯仿,12000 rmin-1离心10 min;
(5)重复步骤4;
(6)取上清液于1.5 ml的灭菌离心管中,加入2.5倍体积的无水乙醇,-20℃沉淀1 h,12000 rmin-1离心10 min;
(7)弃上清液,加入400μl 75%乙醇,12000 rmin-1离心10 min;
(8)重复步骤7;
(9)弃上清液,自然晾干后加30-35μl灭菌水溶解沉淀,离心备用。
1.2.2 原生质体的制备与转化
(1)在100ml的YEPD培养基中培养菌丝,25℃,175r/min,摇培12-14h;
(2)用灭过菌的三层擦镜纸过滤菌丝体,0.7mol/L NaCl冲洗; 小麦赤霉病菌β2-微管蛋白E198A突变型对多菌灵的抗药性调控研究(3):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_26064.html
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