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蔗糖处理对玉米幼叶花青素合成的影响(3)

时间:2016-11-12 20:35来源:毕业论文
试剂:蔗糖溶液、果糖溶液、葡萄糖溶液、20%三氯乙酸(TCA三氯醋酸)、2.5%硫代巴比妥酸(TBA)溶液、乙醇、中性醋酸铅、草酸钠、硫酸、丙酮、EDTA、蒽酮


试剂:蔗糖溶液、果糖溶液、葡萄糖溶液、20%三氯乙酸(TCA三氯醋酸)、2.5%硫代巴比妥酸(TBA)溶液、乙醇、中性醋酸铅、草酸钠、硫酸、丙酮、EDTA、蒽酮、CaCO₃、石英砂、0.1mol/L HCL、100μmol/lEDTA-Na2溶液、20μmol/l核黄素溶液、750mmol/l氮蓝四唑、130mmol/l蛋氨酸、0.05mol/l磷酸缓冲液(PH7.8)[17-22]
相关配法:(1)测定可溶性糖含量(蒽酮法)需用试剂:
乙醚、草酸钠粉末、饱和中性醋酸铅;
1g/l的蒽酮试剂:称取1g经过纯化的蒽酮,用稀硫酸溶液(由760ml比重为1.84的浓硫酸加到300ml水中)溶解并定容至1000ml。测定时新鲜配制。
200mg/l葡萄糖标准溶液:称取已在80℃烘箱中烘至恒重的葡萄糖100mg用蒸馏水溶解并定容至500ml,即得200mg/l葡萄糖标准溶液。此液放入冰箱中保存,使用前一个小时取出回升至室温。
(2)测定花青素、叶绿素含量需用的试剂:
1%酸化乙醇、氯仿 
(3)测定丙二醛含量需用的试剂:
20%三氯乙酸(TCA三氯乙酸);
0.5%硫代巴比妥酸:0.25g的硫代巴比妥酸粉加入到20g的酸氯乙酸中定容至100ml;
三氯乙酸(20%):20g定容到100ml为20%。
(4)测定SOD超氧化物歧化酶含量需用的试剂:
0.05mol/l磷酸缓冲液(PH7.8);
130mmol/l蛋氨酸溶液:称1.9399g蛋氨酸用磷酸缓冲液定容至100ml;
750mmol/l氮蓝四唑溶液:称取0.06133g氮蓝四唑用磷酸缓冲液定容至100ml,避光保存;
100μmol/lEDTA-Na2溶液:称取0.03721gEDTA-Na2,用磷酸缓冲液定容至1000ml;
20μmol/l核黄素溶液:称取0.0753g核黄素用蒸馏水定容到1000ml避光保存。
1.1.3实验所用仪器
实验所用仪器:紫外分光光度计、电子天平(梅特勒)、电炉、恒温水浴箱(予华)、烧杯、容量瓶、移液管、试管、漏斗、滤纸、研钵、刻度试管、离心机(上海一恒)、恒温箱(迪曼德)、剪刀、擦镜纸、量筒、滴管、移液枪、试管架、棕色容量瓶、记号笔、培养皿、分光光度计。
2.2 方法
2.2.1玉米幼苗的培养
挑选出籽粒饱满的玉米种子(如果不是当年的种子需在4℃条件下破除休眠,需24小时)用蒸馏水冲洗三次。将种子用75%的酒精溶液浸泡10min,[29]然后用蒸馏水冲洗三次(每次一分钟,目的是除去玉米种子上残留的酒精),冲洗后再用蒸馏水浸泡45-60min。浸泡过后将种子分装在培养皿中(在培养皿底部垫一层滤纸),每个培养皿用保鲜膜包起来以防止水分蒸发过快[30]。玉米属于长日照植物,培养时应放在白天13小时晚上11小时25℃的培养箱中进行培养,在玉米发芽期间每天进行加水换水以保证玉米快速成长至幼苗。待其长到三叶期时对其用不同浓度糖溶液处理:
表1不同浓度蔗糖处理玉米幼苗
处理条件
玉米
普通玉米
丹科七号
黑玉米
51508
处理一 蒸馏水  蒸馏水
处理二  20mmol/l蔗糖 20mmol/l蔗糖
处理三  40mmol/l蔗糖 40mmol/l蔗糖
处理四  60mmol/l蔗糖  60mmol/l蔗糖
处理五  80mmol/l蔗糖 80mmol/l蔗糖
处理优尔  20mmol/l果糖+20mmol/l葡萄糖  20mmol/l果糖+20mmol/l葡萄糖
处理七  20mmol/l果糖+20mmol/ll葡萄糖+20mmol/l蔗糖  20mmol/l果糖+20mmol/l葡萄糖+20mmol/l蔗糖
蔗糖处理对玉米幼叶花青素合成的影响(3):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_24.html
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