模板RNA/引物变性溶液    15 μL
dNTP Mixture (l0 mM )     1.25 μL
5×M-MLV Buffer    5 μL
RNase Inhibitor(40 U/μL)    0.5 μL
RTase M-MLV(RNase H-)(200 U/μL)    1 μL
RNase free ddH2O    up to 40 μL
42 °C保温1 h，70 °C保温15 min后于冰上冷却，所得cDNA溶液于-20 °C保存备用。
1.5茶树CsGGT1和CsGGT3基因的克隆。
根据本课题转录组数据设计克隆引物，引物序列由南京金斯瑞生物科技有限公司合成。
PCR（Polymerase Chain Reaction）
PCR体系
10×Ex Taq Buffer ( Mg2+ free )    2 µL
2.5 mM dNTP    1.6 µL
25 mM Mgcl2    1.2 µL
Primer-F    1 µL
Primer-R    1 µL
cDNA    1 µL
Ex Taq    0.3 µL
ddH2O    11.9 µL
Total    20 µL
CR程序
95 °C    5 min   
94 °C    30 s

T °C    30 s    35 Cycles
72 °C    1 min   
72 °C    7 min   
4 °C    ∞    注：T为由引物决定的退火温度。
反应后体系进行Agarose凝胶电泳检测，凝胶成像系统下观察并拍照，并与紫外灯下将目的条带切下，按照Gel Extraction Kit(OMEGA)使用说明书回收目的条带。回收产物经Agarose凝胶电泳检测质量后，于-20 °C下保存。 茶树γ-谷氨酰转肽酶基因的克隆及其组织逆境表达差异的研究(4):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_22769.html