粗毛栓菌漆酶的酶谱分析
一、立题依据(国内外研究进展或选题背景、研究意义等)
漆酶(Laccases)是一种结合多个铜离子的蛋白质，蓝色，，属于铜蓝氧化酶， 借助氧将对苯二酚（氢醌）氧化成对苯醌的酚氧化酶的一种，酶的命名和分类号为EC 1.10.3.2，学名应为对二酚∶二氧氧化还原酶。存在于菇、菌及植物中也分布于微生物、菌类中。漆酶可与多种底物作用，在有机合成、生物检测、免疫检测、有毒化合物的消除、生物传感器制作、制浆造纸废水处理、纸浆生物漂白和饮料加工、食药用菌生产、食品分子交联、植物食品保护等方面具有广阔的应用前景和潜在应用价值。漆酶独特的催化特性使其在生物检测中也有广泛的应用,作为高效的生物检测器而成为底物、辅酶、抑制剂等成分分析的有效工具和手段。漆酶可存活于空气中，发生反映后唯一的产物就是水，因此本质上是一种环保型酵素。由于这几年环保意识逐渐被人所重视，因此近年来漆酶也成为众多学者的研究对象。多年来，已对漆酶及其产生菌进行了广泛研究，内容涉及菌株生长特性、漆酶的合成调控、酶的分离纯化和酶学性质等多个方面。现已有近百种不同来源的漆酶被分离纯化并进行了酶学性质研究，一些漆酶基因已被克隆测序，有的还在酵母等真核生物内实现异源表达，但选育新的漆酶产生菌，优化其产酶条件仍是提高漆酶产量的一条重要途径和今后一段时期内研究的热点。
本研究所用粗毛栓菌Trametes gallica是一种能分泌木质素过氧化物酶(Lignin peroxidase，LiP)、锰过氧化物酶(Manganese peroxidase，MnP)和漆酶(Laccase)三种重要木质素降解酶的白腐真菌，具有较好的木质素降解能力。原文请找腾讯752018766优,文-论'文.网http://www.youerw.com/
二、研究的主要内容及预期目标
1、本文主要测定了粗毛栓菌在一种以麦草粉为诱导物的培养液中的产漆酶情况，并对酶的一些基本性质进行了研究，以便为其在生产中的应用提供理论依据。
2、对粗毛栓菌漆酶进行纯化, 并对性质进行探讨, 以便为木质素的降解的研究提供一定的科学依据, 同时为在造纸工业和环保工业上的应用提供一定的理论依据。
3、获得粗毛栓菌同工酶的酶谱。
三、研究方案（思路）
1、产酶培养基的制备。 2、浸提漆酶。 3、对提取的粗酶进行超滤浓缩。
4、对粗菌液盐析、除去盐离子。 5、透析：除去其他大分子物质。
6、离子交换柱层析：收集有酶活力的部分。 7、测定收集的酶的活力。
8、电泳。
四、论文进度安排
1、3月25日，产酶培养基的制备。
2、4月26日，粗酶液的浸提。
3、4月27日，对粗酶液的超滤浓缩。
4、4月29日，盐析。
5、4月30日，透析。
6、5月1日，离子交换柱对漆酶的柱层析。
7、5月4日，漆酶活性测定。
8、5月6日，电泳。
已完成的工作
查阅文献资料，确定研究方法，技术路线和实验方案。
实验准备阶段 ，即材料采集及实验仪器的处理。
实验实施阶段，包括菌株的培养，酶的提取及酶活性的测定。．
未完成的工作
实验实施阶段，包括酶的分离和纯化、测定、电泳等基本实验步骤。
进行数据处理和实验现象分析，撰写实验论文． 1813