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优劣烟叶化学成分分析及其与产品感官品质的相关性研究(PCA) 第5页

更新时间:2016-10-18:  来源:毕业论文
2.4.3 单糖的测定
准确称取0.5g样品,精确至0.0001g,于250mL磨口三角瓶中。加入50.0mL水,盖上塞子,用振荡器震荡萃取60min。用定性滤纸过滤,弃去前几毫升滤液,收集后续滤液分析。
移取1.0mL滤液于100mL容量瓶中,用0.1%苯甲酸溶液稀释定容至刻度,溶液经0.45μm滤膜过滤后进行离子色谱分析。色谱柱为Carbo Pac PA20阴离子交换分析柱(150 mm×3 mm);柱温30℃;2mmol/L NaOH溶液淋洗液流速0.45mL/min,进样量25 µL;分析时间30min。
2.4.4 多酚的测定
在50mL烧杯中称量约100mg绿原酸,约5mg莨菪亭,约100mg芸香苷,准确到0.1mg,加入约30mL甲醇完全溶解,转移到100mL容量瓶中,加萃取液稀释至刻度,为一级标准溶液。10mL一级标准溶液移至100mL容量瓶中用萃取液稀释至刻度,为二级标准溶液。分别准确移取1mL、2mL、5mL二级标准溶液和1mL、2mL、5mL一级标准溶液至100mL容量瓶中用萃取溶液稀释至刻度,此优个标准溶液以及二级标准溶液为系列标准校准溶液。
试样测定水分含量后,称取约100mg,准确至0.1mg,置于50mL锥形瓶内,再准确加入20.0mL 50%甲醇水溶液,用超声波振荡器(频率40kHz)超声提取20min。取约2mL萃取液经0.45μm的水相过滤膜过滤,待分析。
用高效液相色谱测定一系列多酚校准溶液,得到三种多酚的积分峰面积,用峰面积作为纵坐标,多酚浓度作为横坐标分别建立三种多酚的校正曲线。对校正数据进行线性回归(R2>0.99)。然后测定烟草萃取样品,从样品中多酚的峰面积计算每一个烟草萃取样品中三种多酚的浓度(mg/mL)本文来自优%文,论.文/网,毕业论文 www.youerw.com 加7位QQ324'9114找原文。
测定时,色谱柱为250mm×4.6mm,固定相C18填料粒度5µm。流动相A中水:甲醇:乙酸=88:10:2(体积分数);流动相B中水:甲醇:乙酸=10:88:2(体积分数)。柱温30℃,柱流量1mL/min,进样体积10L,检测波长340nm,参比波长480nm,分析时间约40min。洗脱梯度如下表。
表 3 洗脱梯度
时间 A% B% 流速
0 100 0 1.0
16.5 80 20 1.0
30 20 80 1.0
2.4.5 多元酸和高级脂肪酸的测定
称取粉碎、过筛的样品1.00g于100mL三角烧瓶中,加入50mL体积分数为12.5%的H2SO4-CH3OH甲酯化溶液和1mL 5.00mg/mL正十七烷内标溶液,常温下震荡过夜,旋转蒸发除去甲醇以防止萃取时乳化,用15mL二氯甲烷萃取三次,饱和NaHCO3溶液和超纯水分别反萃取一次,无水硫酸镁干燥,浓缩至1mL,0.45µm有机微孔滤膜过滤,取1µL进行气质联用(GC-MS)分析。
色谱柱:HP-INNOWAX 60m×0.32mm×0.25µm;载气:He;流速:1.0mL/min;进样口温度:250℃;传输线温度:220℃;进样量:1µL;分流比:50:1。
升温程序:起始温度60℃,保持2min,以10℃/min的速率升温到110℃,保持2min,再以3℃/min速率升温到150℃;再以15℃/min速率升温到210℃;再以5℃/min速率升温到230℃,保持50min。
MS条件:电离方式:EI;电子能量:70eV;离子源温度:150℃;四级杆温度:230℃;扫描质量范围:45~450 amu。

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