引言
白粉病是一种常见的真菌性病害，引起该病的病原菌属于粉孢属真菌，已经成为无公害蔬菜的大敌，番茄(Tomato)别名西红柿、洋柿子，古名优月柿、喜报三元，在秘鲁和墨西哥，最初称之为“狼桃”，果实营养丰富，具特殊风味，可以生食、煮食、加工制成番茄酱、汁或整果罐藏。番茄是全世界栽培最为普遍的果菜之一，美国、苏联、意大利和中国为主要生产国，在欧、美洲的国家、中国和日本有大面积温室、塑料大棚及其他保护地设施栽培，中国各地普遍种植，栽培面积仍在继续扩大。蕃茄白粉病多在蕃茄生育中、后期发生，中、本文来自优-文^论~文/网，
毕业论文 www.youerw.com 加7位QQ324,9114找源文下部叶片先发病，逐渐向上部叶片蔓延，严重时除顶叶外全部叶片发病，初期在叶面上出现少量点发状的白色细丝状物，发展后成为形状及其大小不一的白色粉斑，白色粉斑继续扩展或合并，致使整个叶片布满白粉，抹掉白粉可见病部组织褪绿，重病叶的叶片正、背面均布满白粉，终使叶片黄枯，植株提早拉秧。本研究以蕃茄为研究材料，对周口地区番茄白粉菌进行形态学及分子生物学鉴定，以期发现白粉病的新动态，为进一步的番茄白粉菌系统进化研究奠定基础。
番茄制品是世界公认的营养健康食品，里面含有丰富的蕃茄素，其具有防癌抗癌、延缓衰老等功效，并对由于运动引起的哮喘病等疾病有潜在的治疗效果。2006年，我国番茄酱出口数量为62.98吨，出口的总金额可达3.56亿美元，蕃茄已经成为中国出口创汇的重要产品之一。近年来，由于蕃茄的大面积的种植，一些真菌性病害和一些细菌性病害的发病和危害年年逐渐加重，其中，番茄白粉病严重影响了蕃茄的质量和产量，尤其是在温室生产中的蕃茄影响更为严重些，致使在防治时不得不使用大量的农药产品，使得防治成本升高，环境污染严重，另外，白粉病菌在露地和保护地都能发生，保护地发病更为严重，流行较快，损失较大。
1.实验部分
1.1实验材料
选用的蕃茄白粉菌于2013年4月取自周口师范学院温室种植的蕃茄白粉病感染叶片。
1.2病菌显微形态鉴定
对不同时期的感染叶片的菌落颜色、形状和大小进行观察，然后取叶片的感染部位，经过一系列的乙醇脱水、醋酸异戊醇置换、二氧化碳临界点干燥及真空镀膜后，用Quanta200型扫描电镜进行观察。
1.3病菌分子生物学鉴定
1.3.1白粉病DNA的提取
用毛刷轻轻刷取感染的叶片，使菌丝和孢子落在含有TE缓冲液的培养皿中，12000r/min离心收集菌体，采用CTAB法提取DNA：1、取两片幼嫩新鲜叶片，置于预冷的研钵中，倒入适量液氮，迅速研磨成粉末状，随后加入3ml预热的2%CTAB抽提缓冲液和50μL抗氧化剂2-巯基乙醇，继续研磨成略有流动性的糊状或粥状，转入1.5ml的离心管中，于65℃水浴锅中保温约60min。2、待混合物冷却至室温后加入等600μL的氯仿-异戊醇(V:V=24：1)溶液混匀，轻轻颠倒离心管几次使管内混合物成乳浊液，常温下10000rpm离心10min，取上清液转入另一干净的离心管中。3、重复步骤2一次。4、取上一步骤中上清液加入2.5倍体积无水乙醇，仔细混匀，-20℃冰箱30min以上，沉淀DNA 4℃，12000rpm离心10min。5、弃去上层有机溶剂，加500μL 75%乙醇洗涤沉淀，4℃下8000rpm离心5min,弃去上清，洗涤沉淀3次。6、倒置或者37℃培养箱烘干。7、加50μL TE缓冲液溶解DNA，于-20℃冷藏备用。
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