毕业论文

打赏
当前位置: 毕业论文 > 生物论文 >

拟南芥脂磷酸磷酸酶 (LPP1)应答盐害的分子机理(3)

时间:2019-11-22 20:51来源:毕业论文
Genexray RNA提取试剂TRizol Invitrogen LB/YEP培养基 TakaRa X-Gluc 上海生工 Silwet L-77 上海生工 去磷酸化酶CIAP TakaRa Reverse transcription kit TakaRa 固体试剂、酚氯仿、TAE等

Genexray

RNA提取试剂TRizol Invitrogen

LB/YEP培养基 TakaRa

X-Gluc 上海生工

Silwet L-77 上海生工

去磷酸化酶CIAP TakaRa

Reverse transcription kit TakaRa

固体试剂、酚氯仿、TAE等 上海生工

1.2  实验方法

1.2.1  提取拟南芥基因组总DNA

剪取拟南芥适量的拟南芥叶片,加入400µl的DNA提取液,研磨均匀。12000rpm离心10min,取300µl上清,加入等体积预冷的酚氯仿,12000rpm离心10min,取上清300µl,再加入等体积异丙醇,混匀,放置于-20℃冰箱冷冻沉淀30min。取出后,12000rpm离心,去上清,加入1ml 70%的乙醇清洗一次,12000rpm,离心去上清,放置于超净工作台自然晾干。根据沉淀量的多少,加入30-50µl的无菌水进行溶解,置于-20℃冰箱中备用。

1.2.2  提取拟南芥总RNA

剪取拟南芥叶片1-2片,置于液氮中冷冻。冷冻过后的叶片加入研钵中研磨成粉末状,转移到RNA EP管中。加入1ml的RNAisoTMplus混匀,室温静置5min,4℃,12000rpm,离心5min;将上清转移到新的RNA EP管中,加入1/5 RNAisoTMplus体积的氯仿,振荡混匀,室温静置5min,4℃,12000rpm,离心15min;将上清转移至新的RNA EP管中,加入等体积的异丙醇,混匀,室温静置10min,4℃,12000rpm,离心10min;去上清,加入1ml 70%的乙醇(DEPC处理)清洗一次,4℃,12000rpm离心5min;去上清,在超净台中吹干,溶于DEPC处理的水中。储存于-80℃备用。

拟南芥脂磷酸磷酸酶 (LPP1)应答盐害的分子机理(3):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_42165.html
------分隔线----------------------------
推荐内容